ELISA

Betekenis
Een heel veel gebruikte methode voor het aantonen van virussen, bacteriën, en toxinen of de antistoffen hiertegen.
Dit laatste is handig, zijn de ziekteverwekkers verdwenen of moeilijk aantoonbaar dan kan de aanwezigheid van de gevormde antistoffen in het lichaam  de recente aanwezigheid alsnog aantonen.

de naam :ELISA?

betekent EnzymLinkedImmunoSorbentAssay,
Vrij vertaald: een bepaling waar een aan antistof/antigen gekoppeld enzym geabsorbeerd (vastgehouden) wordt.

Een voorbeeld van een ELISA:

Hieronder een voorbeeld van een ELISA om de werking van een ELISA duidelijk te maken:

bakje 1 Een klein bakje waarbij aan de binnenkant de antigenen geplakt worden waarop de te bepalen antistoffen passen 
bakje 2 Het antigen is op het oppervlak "geplakt",
als voorbeeld 1 antigen maar het hele oppervlak is er mee bekleed (gecoat)

 

(kan op het lab zelf gebeuren, er zijn per bepaling kant en klare kits te koop waar de  bakjes met antigenen al aanwezig zijn)

bakje 3 Nu komt het monster erbij: menselijk serum waarin al of niet de te bepalen antistoffen

In dit voorbeeld is de antistof aanwezig , als voorbeeld slechts 1 molecuul getoond

Bij een monster zonder het goede antistof geen binding

SPOELEN : ALLES WAT NIET HECHT WORDT VERWIJDERD
bakje 4 Nu wordt het conjugaat toegevoegd:
een antistof gericht tegen menselijke antistoffen

Dit antistof is gekoppeld aan een enzym (zit ook in de kit maar is ook zelf te maken)

Deze tweede antistof kan alleen blijven zitten als de eerste antistof aanwezig is.

Dit is niet zichtbaar, sterker op dit moment is er niets zichtbaar. Gewoon een bakje met wat kleurloze vloeistof

SPOELEN : ALLES WAT NIET HECHT WORDT VERWIJDERD
bakje 5 Toevoegen van substraat, het enzym zet dit om in , en het enzym is er alleen als de eerste antistof er ook was, dus bij een positief monster.
bakje 6 een gekleurd product en nu zien zien we pas wat!, de kleur wijst op de aanwezigheid van de antistof tegen het op het bakje aangebrachte antigen

 

Er zijn meer meisjes die ELISA heten,
Er zijn ook veel verschillende typen ELISA, maar allemaal met de genoemde kenmerken.
De verschillen zijn :
Wat wordt er bepaald? Antigen of antistof?
Wat wordt er aan het enzym gekoppeld: Antigen of antistof?
Wat wordt er geabsorbeerd? Het antigen of de antistof?
Ook het aanhechtingsoppervlak kan anders van vorm zijn : holle buis, bolletje.

Hieronder een multititerplaatje met 96 "bakjes".

multititerplaatje

Een virtuele ELISA uitvoeren? klik hier